菌株簡(jiǎn)介
OrigamiB(DE3)屬于大腸桿菌表達(dá)型菌種,可使用LB培養(yǎng)基在37℃有氧的條件下進(jìn)行培養(yǎng),OrigamiB(DE3)的感受態(tài)細(xì)胞可以在42℃下熱激處理轉(zhuǎn)化質(zhì)粒。使用IPTG可以誘導(dǎo)目的基因高效表達(dá)。 OrigamiB系列菌株同樣具有Origami系列菌株含有的trxB/gor基因突變,但是該菌株是來(lái)源于BL21的lacZY基因突變株。所以,OrigamiB系列菌株是集合BL21,Tuner和Origami三種菌株的優(yōu)點(diǎn)于一身。在thioredoxinreductase(trxB)和glutathionereductase(gor)基因上同時(shí)含有突變,這使得該菌株能夠更加高效的在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)生成二硫鍵,有助于含二硫鍵蛋白的活性蛋白形成。TrxB和Gor基因突變使得質(zhì)粒能夠分別具有卡那和四環(huán)素抗性,所以本菌株無(wú)法用于卡那和四環(huán)素抗性質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。DE3是溶源性的λDE3,所以在lacUV5啟動(dòng)子下攜帶有T7RNA聚合酶的染色體拷貝,因此該菌株適用于pET系列載體,及其他T7啟動(dòng)子系列載體。