菌株簡介
Origami 2系列菌株是K-12菌株衍生而來,在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同時(shí)含有突變,這使得該菌株能夠更加高效的在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)生成二硫鍵,有助于含二硫鍵蛋白的活性蛋白形成。與Origami系列菌株相比,Origami 2系列菌株是卡那敏感的,這使得該菌株能夠適用于大多數(shù)的蛋白表達(dá)質(zhì)粒。Gor基因突變使得該菌株和原來的Origami(DE3)菌株一樣具有四環(huán)素抗性。DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5啟動子下攜帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝。該菌株適用于pET系列載體,及其他T7啟動子系列載體。 Origami 2 (DE3)同時(shí)還是亮氨酸生長缺陷型宿主菌,可用于相關(guān)的克隆以及蛋白表達(dá)。 Origami 2 (DE3)可使用LB培養(yǎng)基在37℃有氧的條件下培養(yǎng),然后用30%甘油-80℃保藏菌種,42℃熱激可將質(zhì)粒轉(zhuǎn)入該菌株,此菌株在IPTG的誘導(dǎo)下可進(jìn)行蛋白表達(dá)。