首先構建了Tum 5-p53雙功能蛋白，然后使用靶向轉運體EcN將其運送到實體腫瘤區域，用于癌癥治療。從MCF-7細胞的mRNA中擴增出抗癌基因p53，將MMP切割位點（PLGLWA）作為融合接頭，將血管生成抑制劑Tum-5和抗癌蛋白p53融合，并克隆到表達載體pET28a中，使用Red/ET同源重組技術將p53置于缺氧啟動子Pvhb下。

參考文獻：He L, Yang H, Tang J, Liu Z, Chen Y, Lu B, He H, Tang S, Sun Y, Liu F, Ding X, Zhang Y, Hu S, Xia L. Intestinal probiotics E. coli Nissle 1917 as a targeted vehicle for delivery of p53 and Tum-5 to solid tumors for cancer therapy. J Biol Eng. 2019 Jun 28;13:58.