為了生產乳酸，將含有Bos Taurus ldh密碼子優化基因的質粒pGAPZB用AvrII限制性內切酶線性化，并通過同源重組整合到巴斯德畢赤酵母X-33染色體DNA中得到菌株命名為X。為了評估乳酸轉運蛋白對產生LDH的巴斯德畢赤酵母菌株的影響，使用了pPICPGKGFP質粒。pPICPGKGFP含有編碼釀酒酵母乳酸轉運蛋白Jen1p的密碼子優化基因或編碼巴斯德畢赤酵母Pas推定轉運蛋白的密碼子最優化基因，分別得到質粒pPGK-JEN和pPGK-Pas。使用限制性內切酶BglII（Life 將質粒pPGK-JEN和pPGK-PAS整合到GS115（his4）菌株中。在不含氨基酸的YNB固體培養基中篩選陽性克隆，所得菌株分別命名為GJ和GS。

參考文獻：de Lima PB, Mulder KC, Melo NT, Carvalho LS, Menino GS, Mulinari E, de Castro VH, Dos Reis TF, Goldman GH, Magalhães BS, Parachin NS. Novel homologous lactate transporter improves L-lactic acid production from glycerol in recombinant strains of Pichia pastoris. Microb Cell Fact. 2016 Sep 15;15(1):158.