對(duì)漆酶基因進(jìn)行化學(xué)合成然后進(jìn)行密碼子優(yōu)化，所有非編碼序列均從5’和3’端切除，在起始密碼子上游5’端193 bp處加入一個(gè)EcoR1位點(diǎn)，在終止子（TAG）密碼子后插入一個(gè)Not1位點(diǎn)。用合成基因中的優(yōu)先密碼子替換天然基因的282個(gè)非優(yōu)先密碼子，克隆到pPIC9K載體中。

參考文獻(xiàn)：Kumar VP, Kolte AP, Dhali A, Naik C, Sridhar M. Enhanced delignification of lignocellulosic substrates by Pichia GS115 expressed recombinant laccase. J Gen Appl Microbiol. 2018 Sep 27;64(4):180-189.