模塊化基因改造光合細菌構建萜類光合成細胞工廠,分五步基因編輯改造菌株:
1. 篩選強啟動子、優化 RBS 強化異源萜合酶表達;
2. 過表達 MEP 限速酶或導入異源 MVA 通路,擴增 IPP、DMAPP 前體;
3. 上調 IspA/CrtE 調控異戊烯焦磷酸中間體量;
4. 篩選高活性萜合酶;
5. 敲除角鯊烯、聚羥基丁酸等競爭通路,融合上下游酶定向引導碳流。
依托 CRISPRi、轉座子完成基因敲除 / 強化,利用光合菌內膜儲存疏水萜類,配合光照參數調控光合產能,驅動 CO?/ 有機碳經改造代謝通路持續合成各類藥用萜類。
五層菌株基因 / 代謝改造模塊
文獻來源:
Oliver Klaus, Fabienne Hilgers, Andreas Nakielski, Dennis Hasenklever, Karl-Erich Jaeger, Ilka M Axmann, Thomas Drepper,
Engineering phototrophic bacteria for the production of terpenoids,
Current Opinion in Biotechnology,
Volume 77,
2022,
102764,
ISSN 0958-1669
文獻鏈接:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0958166922000982?via%3Dihub
