特征特性
雖然原代小鼠肝星狀細胞更能真實地反映肝星狀細胞在小鼠體內(nèi)的生理狀態(tài)，但是一方面原代分離培養(yǎng)肝星狀細胞周期長和對技術(shù)人員和實驗設備要求較高，另一方面此原代細胞在體外的生長增殖能力非常有限，以至于此細胞不能傳代，這些不利因素制約了原代小鼠肝星狀細胞在實驗室的廣泛應用。欣潤生物的研究團隊擁有多年原代細胞分離培養(yǎng)及細胞永生化服務研究經(jīng)驗，成功建立了永生化小鼠肝星狀細胞。 肝星狀細胞具有靜止期和活化期兩種狀態(tài)。正常情況下肝星狀細胞處于靜止狀態(tài)，當肝臟受到炎癥或機械刺激等損傷時，肝星狀細胞被激活，其表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚汀８涡菭罴毎羌毎饣|(zhì)的主要來源，靜止期肝星狀細胞激活并轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞樣細胞，各種致纖維化因素均把肝星狀細胞作為最終靶細胞。肝星狀細胞參與了肝臟的纖維化、炎癥產(chǎn)生和免疫紊亂等大多數(shù)病理生理過程。
細胞凍存步驟
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。明舟生物按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
