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產(chǎn)品名稱

CEM/C1

商品貨號(hào)

MZ-0223

中文名稱

人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

細(xì)胞數(shù)量

1*10^6

組織來源

急性T淋巴細(xì)胞白血病；女性

細(xì)胞種屬

Homo sapiens, human

細(xì)胞污染

HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。

培養(yǎng)基

MCM-0328：CEM/C1細(xì)胞專用培養(yǎng)基

形態(tài)特征

lymphoblast

傳代方法

1:2-1:4

細(xì)胞運(yùn)輸

干冰運(yùn)輸(2ml凍存管)或活細(xì)胞運(yùn)輸（T25細(xì)胞瓶）

細(xì)胞凍存

Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10%.DMSOStorage temperature: liquid nitrogen vapor phase

生長特性

suspension

細(xì)胞描述

CEM/C1是人T細(xì)胞白血病細(xì)胞株CCRF-CEM(見ATCC CCL-119)具有喜樹堿抗性的衍生株。1991年細(xì)胞株選擇并亞克隆了對(duì)CPT的抗性。細(xì)胞表現(xiàn)出對(duì)CPT類似物水溶性的托泊替康和非水溶性的9-氨基-CPT及10,11-亞甲二氧基-CPT具有交叉抗性。CEM/C1細(xì)胞對(duì)CPT的敏感性較母系CEM細(xì)胞低31倍。CEM/C1細(xì)胞表現(xiàn)非典型的多藥抗性和轉(zhuǎn)換拓補(bǔ)異構(gòu)酶I催化活性。對(duì)CPT的抗性維持6個(gè)月以上。

細(xì)胞傳代步驟

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中

復(fù)蘇細(xì)胞步驟

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟

：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

MZ-0448：293T-EGFR-emiRFP670-Puro

MZ-0447：293T-HPV18-L1-BSD

MZ-0445：293T-HPV18-E567-BSD

MZ-0440：C-4I

MZ-0439：小鼠原代牙周膜成纖維細(xì)胞

王經(jīng)理

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