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產品名稱

EA.hy926

商品貨號

MZ-0202

中文名稱

人臍靜脈細胞融合細胞

細胞數量

1*10^6

組織來源

臍靜脈；內皮細胞；A549融合；女性

細胞種屬

Homo sapiens, human

細胞污染

HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。

培養基

MCM-0272：EA.hy926細胞專用培養基

形態特征

epithelial

傳代方法

1:4-1:6

細胞運輸

干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸（T25細胞瓶）

細胞凍存

Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10%.DMSOStorage temperature: liquid nitrogen vapor phase

生長特性

adherent

細胞描述

在PEG脅迫下，將原代培養的人臍靜脈細胞與抗硫鳥嘌呤的A549克隆株融合，構建了人臍靜脈細胞株, EA.hy926。融合子在HAT培養基上生長并以八因子相關抗原篩選。 EA.hy926已經過100次以上的群體倍增(PDLs)。電鏡照片顯示Weibel-Palade小體的細胞質分布以及組織特異性的細胞器，分化的內皮細胞特性如血管生成，體內平衡/血栓形成，血壓及炎癥反應。 [PubMed: 6407019] [PubMed: 2079463] 在本庫通過支原體檢測。在本庫通過STR檢測。

細胞傳代步驟

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中

復蘇細胞步驟

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟

：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養基終止消化，可使用血球計數板計數。2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

MZ-0448：293T-EGFR-emiRFP670-Puro

MZ-0447：293T-HPV18-L1-BSD

MZ-0445：293T-HPV18-E567-BSD

MZ-0440：C-4I

MZ-0439：小鼠原代牙周膜成纖維細胞

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