菌株簡介
KM71是畢赤酵母菌株,屬于真核細胞。一般的針對原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對酵母是無效的,因此為了防止大腸桿菌等原核生物對酵母培養(yǎng)菌株污染,往往會在培養(yǎng)基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素,來抑制細菌菌的污染和生長。KM71畢赤酵母自身表型為MutS,所以KM71轉(zhuǎn)化株只能產(chǎn)生出His+MutS菌株。畢赤酵母適宜的生長溫度是28至30度,一般可以設置在30度培養(yǎng),溫度超過32度對蛋白的表達是有害的,并可能導致細胞的死亡。 KM71畢赤酵母是是組氨酸缺陷型(His4基因型),如果表達載體上攜帶有組氨酸基因,可補償宿主菌的組氨酸缺陷,因此可以在不含組氨酸的培養(yǎng)基上篩選轉(zhuǎn)化子。這些受體菌自發(fā)突變?yōu)榻M氨酸野生型的概率一般低于10-8。 KM71畢赤酵母可以在YPD培養(yǎng)基中生長,或者在補充有組氨酸的minimal media中生長,但是無法在單獨的minimal media培養(yǎng)基中生長。用30%的甘油與培養(yǎng)物混合保藏菌種,質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的方法:電轉(zhuǎn)化。