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100μl

-20℃

MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2

培養(yǎng)基：YPDA 菌株類別：酵母菌 培養(yǎng)條件：28℃，有氧，YPDA 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化：電激 保存方式：30%甘油，-20℃ 基本應(yīng)用：用于酵母雙雜交 備注：

EGY48菌株是Clontech公司開(kāi)發(fā)的LexA 系統(tǒng)酵母雙雜實(shí)驗(yàn)用菌株，MATa型，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進(jìn)行蛋白互作驗(yàn)證或篩庫(kù)試驗(yàn)；Transformation marker為: his3, trp1, ura3，報(bào)告基因?yàn)椋篖EU2；報(bào)告基因UAS（上游激活序列）來(lái)源于LexA op(x6)，只有當(dāng)Bait和Prey互作時(shí)才能啟動(dòng)LEU2表達(dá) 。EGY48-LexA酵母雙雜系統(tǒng)系統(tǒng)需要三種質(zhì)粒配套使用：pLexA、pB42AD、p8op-LacZ。質(zhì)粒pLexA的篩選標(biāo)志為HIS3，用于表達(dá)DNA-BD(來(lái)自原核的202個(gè)氨基酸殘基組成的LexA蛋白)與目標(biāo)蛋白(Bait)的融合蛋白；質(zhì)粒pB42AD的篩選標(biāo)志為TRP1，用于表達(dá)AD(來(lái)自皰疹病毒的88個(gè)氨基酸殘基組成的B42AD蛋白)與目標(biāo)蛋白（Prey）的融合蛋白；報(bào)告質(zhì)粒p8op-LacZ的篩選標(biāo)志為URA3，報(bào)告基因?yàn)長(zhǎng)acZ，報(bào)告基因UAS來(lái)源于LexA op(x8) ，只有當(dāng)Bait和Prey互作時(shí)才能啟動(dòng)LacZ表達(dá)。EGY48菌株可用YPDA在28℃有氧的條件下培養(yǎng),然后用30%甘油保藏菌種。