使用釀酒酵母基因組作為模板和引物組Sam2-F和Sam2-R擴增Sam2。將PCR產物純化并用EcoR I和BamH I消化，然后連接到EcoRI-BamHI消化的質粒pPIC9K中，得到質粒pPIC9K-Sam2。經Bgl II線性化后，質粒pPIC9K-Sam2通過電穿孔法轉化到巴斯德畢赤酵母GS115中，用引物將CBS基因從畢赤酵母GS115中擴增出來，將片段亞克隆到質粒pMD19T中得到質粒pMD19T-CBS，用引物從pPICZα質粒中擴增出博萊霉素基因，擴增后的產物用Spe I消化，然后克隆到pMD19T-CBS的Spe I位點，得到pMD19T-C-Z質粒。

參考文獻：Yu P, Shen X. Enhancing the production of S-adenosyl-L-methionine in Pichia pastoris GS115 by metabolic engineering. AMB Express. 2012 Oct 30;2(1):57.