技術原理：

以工業獸疫鏈球菌 WSH-24 為底盤菌株開展代謝工程改造，借助 nisin 誘導型 pNZ8148 載體實現雙基因協同表達。

一是過表達透明質酸合酶 HasA，提升 HA 前體合成通量，40 ng/mL 乳鏈菌肽誘導下 HA 產量較對照提升 64.9%；二是導入 N 端融合 6×His 標簽的水蛭透明質酸酶 LHAase，通過優化 RBS 核糖體結合序列上調蛋白分泌量，最高酶活達 11113.2 U/mL。

雙基因共表達菌株可同步合成并原位降解透明質酸，大幅降低發酵液黏度，解決高密度發酵溶氧不足難題，一步發酵直接產出低分子量透明質酸寡糖。搖瓶發酵 24 h，寡糖產量 0.97 g/L，較野生株提升 182.0%；3 L 發酵罐放大后產量達 7.06 g/L，生產強度 294.2 mg/(L?h)，產物分子量穩定維持在低寡糖區間，分子量分布集中，為透明質酸寡糖綠色發酵生產提供高效改造策略。

文獻來源：

韋朝寶,堵國成,陳堅,康振. 發酵透明質酸寡糖獸疫鏈球菌工程菌株的構建[J]. 生物工程學報, 2019, 35(5): 805-815

原文鏈接：https://cjb.ijournals.cn/cjbcn/article/abstract/gc19050805