提出了一種將原生質體轉化法和電穿孔法相結合的轉化方法,即地衣芽孢桿菌原生質體電轉化法。該方法一方面利用了原生質體脫壁的特性,有效減少了DNA的穿透阻力;另一方面利用瞬時電擊穿孔的機制增加了質粒DNA進入原生質體細胞的數量,由此提高地衣芽孢桿菌的轉化效率。首先通過制備原生質體的方法去掉阻礙外源DNA進入細胞的細胞壁組分,再利用瞬時電壓沖擊細胞膜產生短暫穿孔,使DNA無需借助凝聚作用而是在電場作用下高效的進入細胞內。這樣做一方面減少了DNA的穿膜阻力,另一方面增加了原生質體細胞接收外源DNA的量,因此提高了地衣芽孢桿菌的轉化效率。
文獻參考:溫賽,楊建國. 地衣芽孢桿菌原生質體電轉化方法的研究[J]. 中國生物工程雜志, 2015, 35(7): 76-82.
