構(gòu)建能夠在鏈霉菌中穩(wěn)定表達(dá)的穿梭載體pIJ8660Ep(含有 GFP 基因片段),以 E.coli ET12567/pUZ8002 作為供體菌,將重組質(zhì)粒pIJ8660Ep 通過接合實(shí)驗(yàn)導(dǎo)入到鏈霉菌SSD49 菌株中,pIJ8660質(zhì)粒以BamHⅠ、KpnⅠ雙酶切后回收約7kb的線性化載體片段,轉(zhuǎn)化到Escherichia coli DH5α感受態(tài)細(xì)胞,引物S533和A684k 以質(zhì)粒pDR4為模板進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增強(qiáng)啟動(dòng)子ermEp片段。

參考文獻(xiàn):劉曉瑜, 馬玉超. 生防鏈霉菌SSD49的綠色熒光蛋白標(biāo)記及其在毛白楊組培苗中的定殖[J]. 生物技術(shù)通報(bào), 2016, 32(9): 197-202.
