在羅伊氏乳桿菌中鑒定了一個II-A CRISPR-Cas9系統(tǒng)，并發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性Cas9（LrCas9）識別廣泛的原間隔鄰近基序（PAM）序列。我們對LrCas9進(jìn)行了重編程，以獲得高效的基因缺失（95.46%）、點(diǎn)突變（86.36%）、大片段缺失（40 kb）和基因整合（1743 bp，73.9%），揭示了黏液結(jié)合蛋白中重復(fù)保守結(jié)構(gòu)域的功能。并通過基因缺失、點(diǎn)突變和基因整合，成功地驗證和優(yōu)化了內(nèi)源性LrCas9的功能

參考文獻(xiàn)：Guo Q, Yan Y, Zhang Z, Xu B, Bangash HL, Sui X, Yang Y, Zhou Z, Zhao S, Peng N. Developing the Limosilactobacillus reuteri Chassis through an Endogenous Programmable Endonuclease-Based Genome Editing Tool. ACS Synth Biol. 2023 Nov 17;12(11):3487-3496.