AKK菌（Akkermansia muciniphila）是人體腸道微生物群中的一種厭氧菌，屬于革蘭氏陰性菌。它主要定植在腸道粘液層，以降解黏蛋白為生，通過降解舊粘液促進新粘液生成，維持腸道黏膜完整性，因此被稱為“腸道守門人”。

普拉梭菌（Faecalibacterium prausnitzii）屬于嚴格厭氧的革蘭氏陽性菌，顯微鏡下呈梭狀或桿狀。在健康成人腸道中，它通常占細菌總量的 5%–15%，是絕對的優(yōu)勢菌種。是人體腸道中最重要的“抗炎衛(wèi)士”，也是健康人腸道菌群中數(shù)量最龐大的“原住民”之一。普拉梭菌產(chǎn)生丁酸鹽等短鏈脂肪酸，丁酸鹽是結(jié)腸上皮細胞的“能量源”，能抑制炎癥因子，維持腸道免疫穩(wěn)態(tài)。在炎癥性腸病（IBD）、腸易激綜合征（IBS）等患者腸道中，普拉梭菌的數(shù)量往往顯著下降，因此常被視為腸道健康的生物標(biāo)志物。 

分為培養(yǎng)基的厭氧預(yù)處理、甘油菌的快速復(fù)蘇、甘油菌的培養(yǎng)三步。

材料準(zhǔn)備：培養(yǎng)基、一次性移液滴管、廢液缸

1. 培養(yǎng)基的厭氧預(yù)處理。將配制好的培養(yǎng)基滅菌后提前一晚放入?yún)捬跏痔紫洌檬痔紫鋬?nèi)的厭氧循環(huán)系統(tǒng)徹底置換溶解氧。次日使用前,，觀察氧化還原指示劑顏色（如仍有氧氣未除盡，可加入一滴L-半胱氨酸還原劑），確保培養(yǎng)基處于嚴格的厭氧狀態(tài)。

2. 甘油菌的快速復(fù)蘇。從-80℃超低溫冰箱中迅速取出凍存菌種，經(jīng)表面消毒后轉(zhuǎn)入手套箱。可通過掌心搓動幫助甘油菌快速解凍，旋開甘油管，用一次性移液滴管吸出管內(nèi)液體，加入到準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基中，用滴管輕輕吹打2-3次。在培養(yǎng)基管上清晰標(biāo)注菌種名稱（AKK菌/普拉梭菌）、復(fù)蘇日期及操作者姓名。

3. 將接種好的培養(yǎng)基管置手套箱內(nèi)的培養(yǎng)架上，24-48小時后的培養(yǎng)基管內(nèi)渾濁度增加。